材料与方法
1.1 材料
以储存0、1、2、3、5、9、12、18、24个月的黑莓果酒为研究材料，黑莓果酒发酵结束后陈酿2个月，经硅藻土过滤后所得，未经澄清剂处理。浓硫酸、蒸馏酚、Folin-酚试剂、无水碳酸钠、考马斯亮蓝G-250、磷酸、无水乙醇等均为分析纯。 UV-1600PC 紫外可见分光光度计（上海美谱达仪器有限公司），JY502电子天平（上海浦春计量仪器有限公司），TGL-16C 高速台式离心机（上海安亭科学仪器厂）。
1.2 方法
采用考马斯亮蓝染色法[9]测定蛋白质含量，采用Folin-酚试剂法[10]测定总酚含量，采用苯酚硫酸法[11]测定总糖含量。将果酒倒入比色皿中，以蒸馏水为参比，于680 nm处测其透光率[12]。
1.3 数据统计与分析
利用Excel 2003 软件处理数据，利用SPSS 13.0 软件进行相关性分析。
2 结果与分析
2.1 黑莓果酒储存过程中蛋白含量的变化
从图1可以看出，随着储存时间的延长，黑莓果酒的蛋白质含量整体呈下降趋势。
2.2 黑莓果酒储存过程中总酚含量的变化
从图2可以看出，随着储存时间的延长，黑莓果酒的总酚含量整体呈下降趋势。
2.3 黑莓果酒储存过程中总糖含量的变化
从图3可以看出，随着储存时间的延长，黑莓果酒中总糖含量下降，但下降不明显。
2.4 黑莓果酒储存过程中澄清度的变化
从图4可以看出，随着储存时间的延长，黑莓果酒澄清度下降幅度增大。
2.5 黑莓果酒储存过程中蛋白含量与澄清度变化的相关性分析
从图5可以看出，蛋白质含量变化与果酒的澄清度变化呈极显著正相关（r2=0.904* *），可见果酒中蛋白质含量与果酒的澄清度关系密切。
2.6 黑莓果酒储藏过程中总酚含量与澄清度的相关性分析
从图6可以看出，黑莓果酒总酚含量与果酒的澄清度呈极显著正相关（r2=0.916* *），可见果酒中的总酚含量与果酒的澄清度关系密切。
2.7 黑莓果酒储藏过程中总糖含量与澄清度相关性分析
从图7可以看出，黑莓果酒的总糖含量与果酒的澄清度
相关性不明显（r2=0.064），可见黑莓果酒中的总糖含量对黑莓果酒产生沉淀的影响不大。
3 结论与讨论
引起果酒沉淀的有生物因素、非生物因素两大类，其中非生物因素主要包括蛋白质、酚类物质、多糖等大分子物质和一些小分子物质。葡萄酒的发展具有悠久的历史，目前对果酒中沉淀机制的研究主要集中在葡萄酒上。大部分研究者认为，蛋白质是引起果酒浑浊的一个重要原因，且蛋白质的含量越高，果酒越不稳定，越易发生沉淀[13-14]。果酒装瓶储存过程中蛋白质的缓慢降解变性导致蛋白絮凝聚集成颗粒，最终导致果酒浑浊沉淀[15]。但持有不同观点的研究者认为，不同的蛋白质有不同的热变性特点，对热诱导产生浑浊的敏感性也不同，对热变性产生果酒浑浊的贡献也不同，并且果酒浑浊也有一些非蛋白因素起协同作用[16-17]。酚类物质是果酒的重要组成部分，是引起果酒沉淀的重要的非生物因素之一[18-19]。Siebert研究结果进一步显示，蛋白质和酚类化合物的比例对浑浊起决定性作用，当酚类化合物的结合位点与蛋白质的结合位点相当时，浑浊度最大[20]。有人认为，蛋白质在变性过程中会在其表面暴露出酚类化合物可以结合的位点，酚类化合物与蛋白质结合之后形成复合物，这些复合物开始是可溶性的，但随着分子的增大，逐渐变得不可溶，复合物继续增大，便会导致果酒浑浊并最终导致果酒产生沉淀[21]。本研究结果表明，随着储藏时间的延长，黑莓果酒中蛋白质含量、总酚含量与澄清度显著下降，多糖含量变化不明显;澄清度的变化与蛋白质和总酚含量的变化成显著正相关，与多糖含量变化的相关性不显著。由此可知，在黑莓果酒储存过程中，蛋白质含量、总酚含量对果酒的澄清度变化起主要作用，糖类物质含量对黑莓果酒沉淀的产生影响不大。蛋白质、酚类物质是引起黑莓果酒沉淀的2个主要的非生物因素，但黑莓果酒中的蛋白除了黑莓本身的蛋白外，还有发酵过程中酵母代谢中产生的蛋白质，究竟是哪些蛋白质参与了果酒的沉淀作用;黑莓是酚类物质含量比较高的水果，但是哪些酚类组分对果酒的沉淀产生重要影响;蛋白质和酚类物质两者之间又是如何结合、结合到何种程度形成不溶性复合物，这些问题都需要进一步深入研究。对这些问题进行研究，有助于明确参与黑莓果酒沉淀的主要蛋白质和酚类组分以及两者之间如何互作导致产生沉淀现象，也为针对性解决黑莓果酒沉淀提供明确的靶标。
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