【摘要】目的分析荧光原位杂交法(FISH)检测人类端粒酶(TECR)基因应用于宫颈癌筛查的作用。方法选择我院收治的患宫颈癌的患者100例,所有患者经过阴道镜、细胞学、杂交捕获以及FISH TERC检查后确诊,研究细胞学与FISH TERC与组织学三者之间存在的联系,分析细胞学、FISH TERC与杂交捕获这三种筛查手段的优势与劣势,评价TERC在宫颈癌筛查中的可行性。结果在对比中发现,FISH TERC的敏感性与阴性预测值比杂交捕获检测值低,和细胞学基本一样,但是FISH TERC的特异性和阳性预检值与准确性比细胞学与杂交捕获明显要好,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论FISH TERC准确性较高,可以有效的应用与宫颈癌的筛查中,值得临床推广。
【关键词】荧光原位杂交法;TERC基因;宫颈癌;筛查方法
【中图分类号】R711.74【文献标识码】B
宫颈癌病因较明确,引发宫颈癌重要因素是高危人乳头瘤病毒的感染。宫颈癌是一个缓慢的连续性发展过程,具有较长并可逆的癌病变时期,人乳头瘤病毒的感染使得女性在宫颈上皮内瘤变发展成浸润性宫颈癌需要5年至20年时间[1],所以宫颈癌能够预防并治疗,在癌病变前期发现并治疗,能阻断宫颈癌的恶性发展,因此,筛查并治疗癌病变是减少宫颈癌恶化的重要手段[2]。本文采取FISH ECR)方法对宫颈癌进行筛查,报告如下:
1. 资料与方法
1.1 一般资料
择我院收治的患宫颈癌的患者100例,年龄20~67岁,所有患者经过阴道镜、细胞学、杂交捕获以及FISH TERC检查后确诊,所有患者在半年内没有任何的宫颈筛查及治疗,并排除妊娠、内科疾病、宫颈上皮内瘤变、恶性肿瘤及全子宫切除术等病例。对所有患者进行细胞学、杂交捕获及FISH TERC检查,并在1~2月后进行阴道镜检查与诊断。
1.2 方法
细胞学检查:在进行宫颈细胞取样的过程中,要保证细胞刷在宫颈口的鳞柱交界同一方向的地方旋转3圈至五圈,把所有脱落的细胞移到细胞保存液当中,固定不少于15分钟。
杂交捕获:试剂盒运用第二代的杂交捕获检测技术,在分子水平下通过基因杂交-化学发光-放大信号的原理进行检测。用锥形采样刷在宫颈口插入并且旋转三周,把所收集的样本放到保存液中。
FISH TERC:根据碱基互补原则,使用荧光素来标记已知的外援单链核酸作为探针,和待检验的样品中未知单链核酸特异性结合,形成能被检测的一种杂交双链核酸,在染色体上的DNA分子是沿着染色体的纵轴呈现出线性排列,能检测杂交位点的荧光显示出特定核酸序列存在及其定位与数量。
1.3 统计学方法
采用SPSS17.2软件分析处理数据,计量资料用(±s)表示,计数资料用x2检验,计量资料用t检验,若P<0.05,表示组间对比有差异,具有统计学意义。
2. 结果
2.1 FISH TERC于细胞学分级中表达(见表1)
表1FISH TERC于细胞学分级中表达细胞学分级例数扩增例数阳性率(%)NILM5623.57ASC-US11327.22LSLL13753.81ASC-H14428.57HSIL6583.332.2 TERCZ在杂交捕获中的表达
100例患者中,杂交捕获阴性有55例,阳性有45例,在杂交捕获在阴性组与阳性组中,TERC的阳性率分别是3.63%与48.89%,对比差异显著,具有统计学意义(P<0.05)。
2.3 TERC于组织学的分级中表达(见表2)
表2TERC于组织学的分级中表达组织学分级例数扩增例数阳性率(%)正常6868.82CIN811.25CIN29888.89CIN311981.81鳞状细胞癌331003. 结论
TERC在筛查宫颈癌过程中国具有非常大的潜力,而FISH是对其基因拷贝数据变化的最佳检测技术,即使TERC在不一样的组织学与细胞学的分级当中有比较多的研究,但是细胞学、杂交捕获及TERC检测对宫颈癌筛查的相关性,在现阶段来说还是欠缺系统性的研究[3]。本研究中采用荧光原位杂交法检测端粒酶基因的技术分别对宫颈癌患者中的细胞异常者、高危人乳头状瘤病呈阳性的患者进行检测,以TERC表达,评价TERC在筛查宫颈癌当中的作用,为筛查宫颈癌提供重要的手段。
参考文献
[1]王霞,赵爱琳.荧光原位杂交技术在检测宫颈上皮细胞hTERC基因扩增的应用进展[J].泰山医学院学报.2010,31(12):74-76
[2]魏力 ,蒋宏颉.荧光原位杂交法检测宫颈脱落细胞端粒酶基因及其与人乳头瘤病毒感染的相关性[J].中国实用妇科与产科杂志.2010,26(05):68-69.
[3]向阳,罗阳,.FISH检测TERC基因对宫颈上皮内瘤变的预测意义[J].中华医院感染学杂志. 2011,23(14):24-25.